【英文题名】
The Expression and Regulation of L-arginine Kinase in Helicoverpa Armigera
【作者】
苏晓峰 ;
【导师】
程红梅 ;
【学位授予单位】
中国农业科学院 ;
【学科专业名称】
生物化学与分子生物学
【学位年度】
2011
【论文级别】
硕士
【网络出版投稿人】
中国农业科学院
【网络出版投稿时间】
2011-09-08
【关键词】
棉铃虫 ;
精氨酸激酶 ;
启动子克隆 ;
Real ;
Time-PCR ;
RNAi ;
生理测定 ;
【英文关键词】
Helicoverpa armigera (Hübner) ;
L-arginine kinase ;
RT-PCR ;
Real Time-PCR ;
RNAi ;
Physiological determination ;
【中文摘要】
棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)是世界性重要的农业害虫,分布广泛。它不仅对棉花造成严重危害,还取食玉米、高粱、大豆等多种农作物。精氨酸激酶(arginine kinase,AK)作为无脊椎动物体内能量代谢的关键酶,研究表明该酶在适应不良环境因子、免疫及防御病原侵袭等过程中也发挥了重要作用。本文以对Bt敏感的棉铃虫品系(96S)为材料,克隆其精氨酸激酶基因及启动子序列,并利用RNAi技术,研究AK在棉铃虫发育过程中的作用。同时以室内用Cry1Ac筛选75代产生2971倍抗性的棉铃虫品系(Bt-R)为材料,研究了AK在其体内的表达情况,还对两个不同品系的棉铃虫进行了抗性相关基因及生理指标测定,分析它们之间存在的差异。本文的主要研究结果如下:
1、利用同源序列信息比对,克隆获得96S品系的AK基因,发现基因内部含有两个外显子和两个内含子,构建原核表达载体并优化表达条件,得到单一可溶性的目的蛋白;
2、利用Genome Walking,对96S品系AK基因启动子进行克隆,向5’非翻译区上游延伸约2Kb,并进行了生物学功能预测;
3、利用Real-Time P...
【英文摘要】
Cotton bollworm, Helicoverpa armigera (Hübner) is one of the important agricultural pests in the world. It not only seriously harms the cotton, also endangers the corn, sorghum, soybean and many kinds of crops. In invertebrates, L-arginine kinase(AK) is the important regulation factor in energy metabolism. The related research shows that AK plays an important role in the processes of adaptation environmental factors, immunity and defense of pathogen. Using Bt Cry1Ac susceptible strain (96S) of H.armigera as...
【更新日期】
2011-10-11
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