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来源于Thermomyces sp.的植酸酶基因在毕赤酵母中的组成型表达  
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【英文篇名】 Constitutive Expression of the Phytase Gene from Thermomyces sp.in Pichia pastoris
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【作者】 张文荟; 沈微; 饶志明; 诸葛斌; 方慧英; 诸葛健;
【英文作者】 ZHANG Wen-hui et al(Key Laboratory of the Ministry of Education; Jiangnan University; Wuxi; Jiangsu 214122);
【作者单位】 江南大学教育部重点实验室江南大学生物工程学院工业微生物中心;
【文献出处】 安徽农业科学 , Journal of Anhui Agricultural Sciences, 编辑部邮箱 2008年 22期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 Thermomyces sp.; 植酸酶; 重组毕赤酵母; 热稳定性;
【英文关键词】 Thermomyces sp.; Phytase; Recombined Pichia; Thermostability;
【摘要】 [目的]研究植酸酶基因在毕赤酵母中的组成型表达。[方法]用PCR方法从嗜热真菌(Thermomyces sp.)中扩增到去除信号肽和内含子后约1.4 kb的phyT基因编码区片段,并对该片段进行克隆与序列测定。[结果]序列相似性分析表明,克隆的植酸酶基因无信号肽和内含子,与报道的嗜热真菌Thermomyces lanuginosus植酸酶基因相似性最高,DNA序列相似性为95%。从验证后的转化子筛选得到了表达嗜热真菌植酸酶的重组毕赤酵母菌株p-phy T,SDS-PAGE分析显示其分子量约为45 kD,重组毕赤酵母成功表达植酸酶。与野生型菌株相比,结果显示重组植酸酶酶活性提高了12.6%,最适温度65℃,75℃仍有64%以上酶活活性;最适pH值为5.5。[结论]嗜热真菌植酸酶基因用组成型质粒能在毕赤酵母中表达。
【英文摘要】 [Objective]The purpose was to study constitutive expression of the Phytase gene from Thermomyces sp.in Pichia pastoris.[Method]The Phytase gene from Thermomyces sp.without intron and signal peptide was amplified and cloned.The gene fragment was about 1.4 kb and had no intron and signal peptide.[Result]Sequence similarity analysis indicated Phytase gene cloned was similar to the Phytase gene from Thermomyces lanuginosis.DNA sequence similarity was 95%.The recombined plasmid p-phy T was transformed to Pichia ...
【基金】 国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2006AA10-Z307)
【更新日期】 2008-10-08
【分类号】 Q78
【正文快照】 植酸酶(Phytase)是一种能降解植酸及其盐类的水解酶。常用于动物的饲料添加剂,存在于动植物、微生物中,可以提高植物性饲料中磷的利用率、降低植酸的抗营养作用及减少环境污染[1]。迄今,植酸酶的研究已比较全面,包括植酸酶的种类、酶学特性、催化机制及其应用[2]。但植酸酶的商

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