【作者】 赵炜； 邱憬；

【机构】 南京医科大学附属口腔医院；

【摘要】 目的构建一种天然蚕丝来源的可注射光固化水凝胶,并试探究其改善骨结合的免疫微环境和促进血管化的作用。方法利用天然蚕茧和丝素缺陷型蚕茧制备丝素和丝胶蛋白溶液,并加以甲基丙酰化修饰,透析后冻干,以获得海绵状的甲基丙酰化丝素蛋白和丝胶蛋白。将相应质量的甲基丙酰化丝素蛋白和丝胶蛋白溶于苯基(2,4,6-三甲基苯甲酰基)磷酸锂标准溶液以配置丝素和丝胶蛋白水凝胶溶液。将丝素和丝胶蛋白水凝胶溶液转入双通道注射器,以一定比例混合后光固化,得到还原蚕丝蛋白水凝胶。以扫描电子显微镜对水凝胶的形貌进行表征。RAW264.7细胞用还原蚕丝蛋白水凝胶培养24小时,以流式细胞术和免疫印迹法(Western Blot)检测其M1和M2极化标记物表达水平。原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)用还原蚕丝蛋白水凝胶培养24小时后以基质胶小管生成实验实验评估其血管生成能力。结果扫描电镜显示还原蚕丝蛋白水凝胶具有约200 nm尺度的孔径,适宜细胞生长。流式细胞术显示,还原蚕丝蛋白水凝胶培养的RAW264.7细胞CD86表达降低而CD206表达升高。Western Blot结果显示,相比对照组,还原蚕丝蛋白水凝胶培养的RAW264.7细胞的iNOS蛋白表达减少而Arg-1表达增加。基质胶小管生成实验中,还原蚕丝蛋白水凝胶HUVEC在体外显示出更强的小管生成能力。结论还原蚕丝蛋白水凝胶来源广泛,易于制备。且一方面促进巨噬细胞的M2向极化,另一方面能够在体外增强HUVEC的血管生成能力,具有潜在的改善种植体骨结合免疫微环境并促进血管化的协同治疗效果。更多还原