C5a/C5aR信号在微小隐孢子虫感染中的免疫调节作用研究

【作者】 伍雪梅； 原亚杰； 尹艳玲； 宋军科； 杨新； 赵光辉；

【机构】 西北农林科技大学动物医学院；

【摘要】 隐孢子虫病是由隐孢子虫(Cryptosporidium)感染引起的一种人兽共患原虫病,其感染对宿主造成的危害与宿主免疫状况密切相关。研究发现,CD4~+T细胞是宿主防御隐孢子虫感染的关键细胞,而C5a/C5aR信号可直接或间接调控CD4~+T细胞的效应,从而参与宿主抵御感染过程,但目前对于C5a/C5aR信号在隐孢子虫感染中的作用尚不清楚。基于此,本研究以微小隐孢子虫(C.parvum)为研究对象,以BALB/c乳鼠和C5aR抑制BALB/c乳鼠为感染模型,应用实时荧光定量PCR和免疫组织化学技术检测了C.parvum感染前后乳鼠回肠组织中C5aR的表达变化,利用实时荧光定量PCR检测了隐孢子虫HSP70基因和CD4~+T细胞亚群(Th1、Th2、Th17细胞和Treg细胞)主效应细胞因子(IFN-y、IL-4、IL-17和TGF-β)的表达变化,并通过病理组织切片观察乳鼠回肠黏膜的损伤情况。结果显示,与对照组乳鼠相比,C.parvum感染可以引起乳鼠回肠组织中C5aR的mRNA和蛋白表达水平显著上调(P <0.05),以及IFN-γ表达水平显著上调(P <0.05);与感染组乳鼠相比,C.parvum感染可以引起C5aR抑制乳鼠肠道组织中Th1细胞、Th2细胞和Treg细胞的主效应细胞因子IFN-γ、IL-4和TGF-β显著下调表达(P<0.05),以及Th17细胞主效应细胞因子IL-17显著上调表达(P<0.05)。乳鼠回肠组织病理学观察发现,抑制C5aR能显著改善C.parvum感染引起的乳鼠回肠组织的绒毛直径和黏膜厚度变化(P<0.05),但不能改善绒毛长度、绒毛长度与隐窝深度比值。隐孢子虫HSP70基因的mRNA检测发现,抑制C5aR能显著影响C.parvum在回肠组织中的增殖(P<0.05)。本研究结果表明C5a/C5aR信号可能通过调节CD4~+T细胞亚群主效应细胞因子的表达来参与宿主抗C.parvum感染的过程,为深入理解隐孢子虫与宿主的互作机制研究提供了参考。更多还原