不同传代比例对MDCK细胞培养效果的影响

【作者】 王美皓； 李自良； 赵彩红； 李倬； 张雪梅； 乔自林； 马忠仁； 王家敏；

【机构】 西北民族大学生物医学研究中心甘肃省动物细胞技术创新中心； 西北民族大学生命科学与工程学院； 长春生物制品研究所有限责任公司；

【摘要】 探讨不同传代比例对MDCK细胞培养效果的影响。在含10%牛血清的DMEM培养液中按不同传代比例连续传代培养MDCK细胞,分别用传代稳定性观察、绘制生长曲线、生长动力学分析的方法评价不同传代比例对MDCK细胞培养效果的影响,并进一步在细胞工厂中扩大培养验证。不同传代比例的MDCK细胞均能在48h增殖到单层致密,细胞生长曲线均趋于"S"型,细胞最大增殖密度均达到11×104cells/cm2以上且差异不显著(P>0.05);生长动力学分析发现,传代比例为1:8的MDCK细胞平均最大比生长速率显著高于其他传代比例(P<0.05),但与传代比例为1:7的MDCK细胞差异不显著(P>0.05);传代比例为1:8的MDCK细胞倍增时间明显优于其他传代比例的MDCK细胞。在1层和10层细胞工厂中连续传代培养MDCK细胞,细胞生长良好,传代过程中细胞生长稳定。从疫苗研发和生产的成本考虑,MDCK细胞培养时传代比例为1:8更具优势。更多还原