肠菌素结合载体疫苗降低空肠弯曲菌在鸡肠道定植的研究

【作者】 崔一芳； 郭芳芳； 曹晓亚； 杨兵； 周宏专； 苏霞； 徐福洲；

【机构】 北京市农林科学院畜牧兽医研究所,畜禽疫病防控技术北京市重点实验室；

【摘要】 空肠弯曲菌是引起人细菌性肠炎的主要病原,是最重要的食源性病原微生物之一。该菌感染鸡不引起任何明显的临床症状,但在鸡肠道内长期定植,是人弯曲菌病的主要污染来源。肠菌素（enterobactin,Ent）是由肠杆菌科细菌分泌的一种小分子化合物,对铁离子具有极高亲和力,在维持肠道细菌铁代谢平衡方面发挥关键作用;空肠弯曲菌自身不能分泌Ent,但可利用Ent介导的铁摄取系统,帮助其在肠道定植。基于此,本研究将小分子Ent与大分子载体蛋白匙孔血蓝蛋白（keyhole limpet hemocyanin,KLH）偶联,制备Ent-KLH结合载体蛋白疫苗,与佐剂乳化后免疫SPF雏鸡,通过三次独立的鸡免疫攻毒试验,评价了该结合载体疫苗的安全性、免疫效力、抗体持续期等不同指标。结果显示,在安全性评价方面,Ent-KLH疫苗免疫鸡三次后对鸡增重、主要免疫器官（肝脏、脾脏、法氏囊、胸腺）发育、肠道微生物菌群组成等均无显著影响;在免疫效力评价方面,Ent-KLH疫苗免疫鸡一次、二次或三次均可在鸡体内诱导高水平的Ent特异性血清抗体,免疫二次或三次后使用空肠弯曲菌NCTC 11168口服攻毒,可显著降低其在肠道定植3-4log₁₀单位;抗体持续期结果显示,经单次免疫后鸡血清Ent特异性抗体可持续分泌8周。本试验结果显示,研制的Ent-KLH结合载体蛋白疫苗免疫鸡具有良好的安全性,诱导产生的高水平Ent特异性抗体可显著降低空肠弯曲菌在鸡肠道内的定植水平,该载体疫苗的研制对降低鸡肠道食源性微生物定植水平、提高动物源性食品安全将具有重要意义和潜在应用价值。更多还原