四川山地乌骨鸡白细胞介素16基因克隆测序及真核表达质粒构建

【作者】 余协中； 王红宁； 黄勇； 张毅； 徐永莉；

【机构】 四川农业大学动物科技学院； 四川大学"985工程"西南资源环境与灾害防治科技创新平台、生命科学学院；

【摘要】 本研究根据Genbank中鸡IL-16序列设计引物对,采用RT-PCR法从四川山地乌骨鸡脾淋巴细胞RNA中扩增得到CHIL-16基因,将其克隆到PMD18-T载体,并进行了序列测定分析。结果表明:该克隆的cDNA包括全长开放阅读框为1824bp,编码608个氨基酸。与Genebank已报道的鸡的IL-16序列相比较,二者核苷酸序列的同源性为99.2%-99.7%,共有5-7个碱基发生变异。与鸭子IL-16核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性分别为86.1%和85.5%-85.7%。该基因经BamHI和EcoRV双酶切后,插入同样经BamHI和EcoR V双酶切真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建了真核表达质粒pcDNA-IL-16。更多还原