禽流感病毒H5N1亚型HA基因的高效可溶表达及抗原性分析

【作者】 李少璃； 谢青梅； 陈丽； 周庆丰； 马静云； 曹永长；

【机构】 华南农业大学动物科学学院；

【摘要】 根据GenBank公布的H5N1亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因序列设计引物,用RT-PCR方法扩增H5N1亚型禽流感病毒HA基因。将该片段定向插入到笔者所在实验室设计的原核表达载体pBCX中,构建重组表达载体pBCX-HA。将阳性质粒转化到大肠杆菌BL-21(DE3)感受态细胞中诱导表达,SDS-PAGE可检测到分子量约为94.7ku的融合蛋白,表达产物占菌体总蛋白的22.5%。同时将重组表达质粒pET32a(+)-HA在同一条件下进行诱导表达,表达产物占菌体总蛋白的18.5%。经蛋白可溶性分析可看出,pBCX-HA融合蛋白主要以可溶形式存在。经Western-blot证实,可溶表达的融合蛋白与H5N1 AIV阳性血清具有良好的免疫反应性。更多还原