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表达禽流感HA基因的重组马立克氏病病毒的构建
【机构】 北京市农林科学院畜牧兽医研究所； 军事医学科学院动物中心；
【摘要】 通过ApaⅠ和NotⅠ位点将HA基因亚克隆到表达LacZ基因的重组马立克氏病病毒的转移载体中,该转移载体的US片段内含有hCMV启动子和增强子控制的含LacZ和HA基因表达盒克隆,从而成功地构建了表达HA基因的马立克氏病病毒的转移载体。然后,通过脂质体方法转染已感染马立克氏病病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)中,用96孔板稀释法纯化表达LacZ基因和HA基因的重组MDVCV1988病毒株,获得蓝色的重组病毒。该重组病毒通过PCR方法鉴定证实其基因组中含有完整的HA基因。免疫酶反应和Western-blot证实重组病毒能表达禽流感病毒HA蛋白。经6次纯化后,重组病毒的血凝效价达到1:64。
【关键词】 禽流感病毒；
HA基因；
重组马立克氏病病毒转移载体；
【基金】 国家自然科学基金(30440011)
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会
- 【会议时间】2006-10-15
- 【会议地点】中国湖南长沙
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会禽病学分会