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H7亚型禽流感病毒HA1基因的克隆与原核表达
【作者】 庞平； 唐懿； 雷霆； 武山； 李强； 陈晨； 曹红； 陈福勇；
【机构】 中国农业大学动物医学院；
【摘要】 禽流感是目前影响世界养禽业的最严重的疫病之一。血凝素(HA)是禽流感病毒重要的结构蛋白,是诱导体液免疫的关键靶抗原。HA分为HA1和HA2两部分,各部分的抗原性和免疫原性也有差别,研究表明HA1的免疫原性和抗原性强于HA2。本研究利用PCR技术亚克隆了H7亚型禽流感病毒的HA1基因,并将PCR产物连接到克隆载体pMD 18-T Simple vector,转化大肠杆菌。测序结果表明所克隆的片断大小为1035bp。将HA1基因克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,经酶切和PCR鉴定,证明成功构建了重组表达载体pGEX-HA1。将构建好的融合表达载体在IPTG的诱导下在大肠杆菌中得到了表达。融合蛋白GST-HA1的分子量为63kD。Western-Blot和ELISA方法鉴定结果表明,融合蛋白与H7亚型禽流感阳性血清发生特异性反应,而与H5、H9亚型抗血清不发生反应。
【基金】 国家科技攻关计划课题(课题任务书编号:2004BA519A18)资助
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会
- 【会议时间】2006-10-15
- 【会议地点】中国湖南长沙
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会禽病学分会