禽流感H5亚型血凝抑制试验抗原的研究

【作者】 刘月焕； 步卫东； 孟颜妮； 姜北宇； 徐菁； 宋维平； 林健； 韩春华；

【机构】 北京市农林科学院畜牧兽医研究所；

【摘要】 以野外分离的禽流感H5N1亚型病毒AIV-GBL株为种毒,接种SPF鸡胚和免疫SPF鸡分别制成禽流感H5亚型血凝抑制试验抗原与阴、阳性血清。抗原用于血凝抑制试验检测禽流感H5亚型抗体,阴、阳性血清用于禽流感H5亚型血凝抑制试验参照血清。对产品的多项技术指标进行了测定,结果表明(1)抗原为无色半透明液体,血清为淡黄色透明液体,无细菌生长;(2)抗原对9～11日龄鸡胚和6～8周龄的SPF鸡没有致病性,接种鸡无局部和全身不良反应;(3)抗原2～8℃条件下放置2年,效价稳定为≥1:128,物理性状不变;37℃条件下存放30天,效价稳定为≥1:128,物理性状不变;-20℃的冷冻条件下,冷冻30天,效价稳定为≥1:128,物理性状不变。4个HA工作单位配制好的4单位血凝抗原,放置1个小时效价不会降低。血凝板放置12小时仍能保持原结果;(4)抗原与ND、EDS76、IB、H1～H4、H5～H15亚型阳性血清和SPF阴性血清没有交叉反应;(5)抗原具有很高的批间及批内可重复性;(6)研制的抗原与国家参考实验室生产的抗原对相同的血清及参考阳性血清的检测结果无明显差异,与WHO抗原对相同血清的检测结果有4～8倍的差异。更多还原