NLRP3介导的细胞焦亡在间歇性低氧诱导肺泡上皮细胞EMT中的作用及机制初探

【作者】 高玉婷； 唐海英；

【机构】 大连医科大学附属第一医院；

【摘要】 目的初探NLRP3介导的细胞焦亡在间歇性低氧诱导肺泡上皮细胞EMT中的作用及机制方法将A549细胞随机分为常氧(RA)组和间歇性低氧(IH)组。采用光学显微镜观察、蛋白免疫印迹、免疫荧光和ELISA评估细胞EMT改变及NLRP3炎症小体介导的焦亡通路相关分子表达。使用siNLRP3干扰技术特异性抑制NLRP3表达,将A549细胞分为RA组、IH组、siNLRP3+IH组,使用qRT-PCR评估干扰效果,检测细胞EMT改变及NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡通路。结果光镜下可见,RA组细胞呈立方状、边界清晰、排列整齐,IH组细胞两端细长、极性消失、排列紊乱。免疫荧光和蛋白免疫印迹结果显示,与RA组比较,IH组E-钙黏蛋白表达明显减少,波形蛋白、α-SMA、NLRP3、半胱天冬酶-1前体、半胱天冬酶-1和GSDMD表达显著增加(P<0.05)。ELISA结果显示,IH组与RA组比较,IL-1β释放显著升高(P<0.05)。特异性抑制NLRP3后,siNLRP3+IH组细胞波形蛋白、α-SMA、NLRP3、半胱天冬酶-1前体、半胱天冬酶-1和GSDMD表达明显低于IH组,E-钙黏蛋白表达高于IH组(P<0.05)。结论IH可能通过激活NLRP3介导的细胞焦亡致肺泡上皮细胞EMT改变,抑制NLRP3的表达可下调NLRP3介导的细胞焦亡信号通路活性,从而减轻IH诱导的肺泡上皮细胞EMT的程度。更多还原