巨噬细胞迁移抑制因子通过调节AMPK信号通路改善HepG2细胞的胰岛素抵抗

【作者】 郝杨敏； 刘华； 杜国利；

【机构】 新疆医科大学第一附属医院内分泌科；

【摘要】 探索巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)改善肝细胞胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的作用和机制。方法:通过高浓度胰岛素诱导体外胰岛素抵抗模型建立的方法,设置不同胰岛素浓度(0,10-9,10-8,10-7,10-6,10-5mol/L)处理人肝癌HepG2细胞建立IR模型,采用葡萄糖氧化酶法检测细胞的葡萄糖消耗量以及cck-8法测吸光值计算细胞活性来确定胰岛素浓度。设置不同的人重组巨噬细胞迁移抑制因子(rMIF)浓度梯度(0,25,50,100,200ng/ml)处理胰岛素抵抗模型24h,使用Westing blot蛋白质印迹检测rMIF不同浓度对于胰岛素抵抗模型,p-AKT和p-PI3K蛋白的表达。使用MIF敲低慢病毒转染(MIF shRNA)胰岛素抵抗模型细胞。最后采用用葡萄糖氧化酶法检测四组细胞的葡萄糖消耗量,RT-PCR技术检测细胞中InsR,PI3K,AKT,葡萄糖转运蛋白2(GLUT2),磷酸烯醇丙酮酸羧(PEPCK),葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)的m RNA表达,Western blot技术检测细胞中IRS-1、p-PI3K、p-Akt的表达。结果:MIF显著增加Hep G2细胞的胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗,IR+rMIF组增加IRS-1蛋白表达水平,还增加了IRS-1,PI3K,GLUT2的m RNA相对表达量,降低了PEPCK、G6Pase的m RNA相对表达量。结论:MIF可改善HepG2细胞的胰岛素抵抗,其可能通过调控IRS-1/PI3K/Akt信号通路调节蛋白活性,促进糖原合成,降低血糖,改善胰岛素抵抗。更多还原