异泽兰黄素Eupatilin在牙周炎辅助药物治疗中抗破骨作用研究

【作者】 赵博轩； 杜民权；

【机构】 武汉大学口腔医院；

【摘要】 目的在牙周细菌刺激下宿主产生免疫应答并发生炎症反应,在此过程中释放的细胞因子,对破骨细胞的形成及骨吸收起到激活和促进的作用,对牙周炎的组织破坏起到不可或缺的影响。本研究旨在通过体外细胞模型探究Eupatilin对破骨细胞前体细胞向破骨细胞分化的抑制作用,并寻找潜在的分子机制;同时通过体内动物模型探究Eupatilin在小鼠实验性牙周炎中的作用。方法用RANKL诱导破骨细胞前体细胞RAW264.7以及小鼠骨髓巨噬细胞(BMDMs)分化形成破骨细胞,使用不同浓度的Eupatilin治疗后,通过TRAP染色和F-actin染色评价Eupatilin对RANKL诱导的破骨细胞形成作用,qRT-PCR、WB检测破骨细胞相关标志基因的表达,WB检测MAPK和NF-κB通路分子的磷酸化水平。通过RNA-seq寻找潜在的分子机制。结果20μM的Eupatilin对破骨细胞的分化形成具有显著的抑制作用,同时对相关标志基因Nfatc1、Trap、Mmp9、Ctsk等的表达也表现出有效的下调作用。WB结果显示Eupatilin显著抑制了RANKL诱导的MAPK和NF-κB通路分子的磷酸化水平。通过RNA-seq选取差异基因Siglec-15,在RAW264.7细胞系中过表达Siglec-15,对Eupatilin抑制RANKL的破骨细胞形成产生挽救作用。在RANKL作用的RAW264.7细胞系中使用MAPK通路激活剂,挽救了Eupatilin对Siglec-15表达的下调,并回复了对破骨细胞形成的抑制作用。结论 Eupatilin通过调控MAPK通路抑制Siglec-15的表达,对RAW264.7及BMDMs向破骨细胞分化具有显著的抑制作用;Eupatilin在实验性牙周炎中也表现出有效的对牙槽骨吸收的抑制效能,在牙周炎防治中具有良好的应用潜能。更多还原