WNT信号通路调控ABCG2促进口腔鳞癌奥沙利铂耐药

【作者】 孙凯瑞； 张旭阳； 甘瑞环； 郑大利； 卢友光；

【机构】 福建医科大学口腔医学院；

【摘要】 目的探索转运蛋白ABCG2在口腔鳞癌奥沙利铂耐药中的作用,以及WNT经典信号通路上调ABCG2促进化疗耐药的分子机制。方法通过逐步提高药物浓度的方法构建口腔鳞癌奥沙利铂耐药细胞株,转录组测序分析并筛选目的基因;通过qPCR和WB实验检测目的基因ABCG2的表达,使用siRNA干扰法敲降ABCG2,并通过CCK8法检测细胞耐药性变化,免疫荧光、流式细胞术以及高效液相色谱实验检测转运能力的变化;通过过表达配体WNT3激活WNT经典信号通路或siRNA敲降WNT3抑制通路,检测耐药性和转运能力的变化;采用染色质免疫沉淀法(ChIP)检测WNT通路转录因子LEF1与ABCG2启动子结合能力的变化。结果口腔鳞癌奥沙利铂耐药细胞中ABCG2表达上调、外排能力增强,敲降ABCG2降低了耐药细胞IC50、抑制外排能力;耐药细胞WNT经典信号通路活化,WNT3配体上调;过表达WNT3上调IC50、促进外排,敲降WNT3降低IC50、抑制外排;WNT3上调激活WNT经典通路,增强转录因子LEF1与ABCG2启动子的结合能力。结论 WNT经典信号通路激活上调了ABCG2的表达,促进口腔鳞癌奥沙利铂耐药。更多还原