基于网络药理学及细胞生物学初探野黄芩苷抑制口腔白斑癌变的作用机制

【作者】 叶赛； 张颖； 夏荣辉； 赵晓娴； 周永梅； 吴岚；

【机构】 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔黏膜病科； 上海交通大学口腔医学院,国家口腔医学中心,国家口腔疾病临床医学研究中心,上海市口腔医学重点实验室； 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科；

【摘要】 目的:网络药理学分析野黄芩苷抑制口腔白斑癌变的分子机制,采用细胞生物学进一步验证分子靶点。方法:通过网络药理学挖掘野黄芩苷作用于口腔白斑的分子靶点,构建蛋白互作网络,并通过GO、KEGG分析预测野黄芩苷可能作用靶点及相关通路。CCK-8实验验证野黄芩苷对口腔白斑细胞、舌癌细胞增殖的抑制作用;Transwell实验观察野黄芩苷对口腔白斑细胞、舌癌细胞迁移和侵袭的影响;Western bolt检测网络药理学挖掘的相关分子靶点的表达,探寻潜在分子机制。结果:野黄芩苷作用于口腔白斑的潜在作用靶点共29个,其中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、缺氧诱导因子-1α (hypoxia inducible factor-1, HIF-1α)为其中关键靶点;GO分析结果显示野黄芩苷高度参与细胞及组织对缺氧的反应;KEGG分析结果显示野黄芩苷显著作用于组织缺氧相关的HIF-1α信号通路。体外细胞实验显示野黄芩苷能显著抑制舌癌细胞Cal-27和口腔白斑细胞Leuk-1的增殖;Western blot进一步验证了关键分子靶点,发现50μM的野黄芩苷能明显抑制Leuk-1和Cal-27细胞内HIF-1α、VEGF蛋白的表达。结论:野黄芩苷可能通过抑制HIF-1α信号通路表达对口腔白斑癌变起抑制作用。更多还原