锑通过铁自噬诱导神经元细胞铁死亡的机制研究

【作者】 于莎莉； 王瑞； 秦子玉； 吴启运； 张子阳； 赵新元；

【机构】 南通大学公共卫生学院环境卫生学教研室；

【摘要】 目的解析铁自噬在锑诱导神经元铁死亡中的作用及机制。方法建立小鼠锑体内暴露模型及PC12细胞体外暴露模型,结合铁死亡特异性抑制剂Fer-1干预模型,通过免疫荧光、免疫组化、荧光探针及免疫印迹等方法检测铁死亡相关指标及小鼠神经损伤与细胞毒性相关指标,明确神经元铁死亡在锑诱导的神经毒性中的作用。体内外检测铁蛋白的表达和降解速率,结合自噬抑制模型,明确锑对神经元铁自噬的影响。构建腺病毒载体,特异性在小鼠神经元上过表达FTH1蛋白,体内外干预自噬,在此基础上构建锑暴露模型,检测细胞和动物模型中海马区神经元铁离子浓度,铁死亡经典生化和分子指标,明确铁自噬在锑诱导神经元铁死亡中的关键作用。最后,通过基因干扰,鉴定锑暴露后介导铁蛋白降解的自噬受体。结果锑暴露可诱导小鼠海马区神经元和PC12细胞发生铁死亡,抑制铁死亡有效降低锑的神经毒性。锑暴露促进铁蛋白降解,过表达铁蛋白及抑制自噬可显著抑制锑诱导的神经元铁死亡。抑制NCOA4有效抑制锑暴露介导的铁蛋白降解和铁死亡。结论锑通过NCOA4依赖的方式激活铁自噬导致神经元细胞铁死亡。更多还原