克白合剂通过SCF/Kit/MITF信号通路治疗白癜风的作用机制研究

【作者】 傅晓燕； 尉晓冬； 黄巧玲；

【机构】 杭州市第三人民医院；

【摘要】 目的 :研究克白合剂治疗白癜风的作用机制。方法:建立正常人表皮黑素细胞(MC)培养体系,加入克白合剂并作用一定时间后采用MTT法、L-DOPA法、NaOH裂解法等分别测定对黑素细胞增殖活性影响、酪氨酸酶活性影响,黑素含量等。并测定克白合剂处理后角质形成细胞(KC)上清对黑素细胞影响,采用特异性抗体ACK2阻断Kit受体后,检测克白合剂处理KC细胞后上清对黑素细胞MITF、Tyr、TRP-1表达的影响。结果 :4 mg/mL和2 mg/mL浓度的克白合剂无明显细胞毒性。4 mg/mL克白合剂对黑素细胞增殖作用:24 h时对照组为0.141±0.042,克白合剂组为0.173±0.032;48 h时对照组为0.162±0.054,克白合剂组为0.214±0.048(P<0.01)。对照组酪氨酸酶活性为0.092±0.021,克白合剂组为0.120±0.031(P<0.01);对照组黑素含量为4.53±0.61 fg/cell,克白合剂组为5.81±0.96 fg/cell。克白合剂组对黑素细胞c-kit的m RNA表达为对照组的4.43倍;MITF的mRNA表达为对照组的2.98倍;Tyr表达为对照的2.29倍。加克白合剂后KC细胞上清中SCF量为52.78±11.24 ng/mL,空白对照组为38.43±10.87 ng/mL,SCF的mRNA表达量为对照组的3.63倍,黑素细胞c-kit的mRNA表达为对照组的4.45倍;MITF的mRNA表达为对照组的4.12倍,Tyr表达为对照组的3.78倍,黑素细胞增殖增加1.89倍,黑素合成量增加35%。用特异性抗体ACK2阻断Kit受体后,黑素细胞的MITF、Tyr表达明显下降,均不及空白组。结论 :克白合剂具有促进黑素细胞活力、增加酪氨酸酶活性的作用,并通过SCF/Kit/MITF信号通路来发挥疗效,为临床使用提供理论依据。更多还原