一种桃蚜从转病毒全基因组植物或冷冻病叶片获取马铃薯卷叶属病毒的方法

【作者】 左登攀； 陈相儒； 胡汝检； 赵添羽； 张晓艳； 彭艳梅； 王颖； 李大伟； 于嘉林； 韩成贵；

【机构】 中国农业大学植物病理学系农业生物技术国家重点实验室；

【摘要】 马铃薯卷叶病毒属病毒(Poleroviruses)为正义单链RNA (+ssRNA)病毒,病毒粒子为球形,直径为25～35nm,无包膜,病毒粒子由外壳蛋白和病毒基因组RNA (genomic RNA,gRNA)组成。马铃薯卷叶病毒属病毒在世界范围内分布广泛,可以侵染十字花科、藜科、葫芦科、禾本科等多种植物,引起严重病害和经济损失。马铃薯卷叶病毒属病毒局限于寄主植物组织的韧皮部,不能机械接种,自然情况下通过介体蚜虫以持久循回非增殖型方式进行传播,还可通过农杆菌浸润或者嫁接等方式进行传播。尽管有病毒侵染性cDNA克隆由农杆菌介导侵染,但存在接种效率不稳定和不能取代自然介体接种条件,因此需要解决毒源保存并可以进行蚜虫传毒的方法。芸薹黄化病毒(Brassica yellows virus,BrYV)是马铃薯卷叶病毒属(Polerovirus)新发现的一种病毒,在中国大陆11个省市均有分布,BrYV主要侵染卷心菜(Brassica oleracea var.capitata)、大白菜(B.pekinensis)、菜花(B.oleracea var.botrytis)、芥菜(B.juncea)、萝卜(Raphanus sativus var.oleifera)等多种十字花科作物,在田间引起作物黄化和叶片卷曲症状。本研究利用桃蚜从病毒转基因植物和冷冻病叶中获得马铃薯卷叶病毒属芸薹黄花病毒(Brassica yellows virus,BrYV)并传播的方法。以携带含有芸薹黄化病毒全基因组的转基因拟南芥种子来源的植株和-20℃冷冻方法保存的带毒植株对桃蚜(Myzuspersicae)进行饲毒,结果表明桃蚜可从病毒转基因植物及冷冻病叶中获得BrYV并传播至健康植物,桃蚜获毒能力和传毒能力与新鲜病叶比较无明显差异,此方法简便、准确、可行。此研究为芸薹黄化病毒等马铃薯卷叶病毒属病毒与寄主互作研究、病毒生物学基础研究、品种抗性评价和其他昆虫介体传毒病毒的毒源保存与利用提供了借鉴思路和基础研究方法。更多还原