胞啃作用及Bryostatin1通过改变靶抗原浓度对CART细胞治疗的影响

【作者】 王晓峰； 宋淑霞； 宋小天； 姚智燕； 张征峥； 魏林；

【机构】 河北医科大学；

【摘要】 胞啃是通过细胞-细胞接触在细胞间进行信息交流的一种方式。CART细胞通过CAR介导的"胞啃"过程,可将肿瘤表面特异性抗原转移到CART细胞表面。胞啃的发生不仅会减少肿瘤细胞表面抗原密度,影响CART细胞的识别;而且"带有肿瘤抗原"的CART细胞会成为其它CART细胞杀伤的靶子,引起CART细胞互相残杀,是钝化CAR-T细胞治疗效果或造成CART细胞耐药的重要机制。本研究分别利用CD19 CART和CD20 CART细胞与CD19~+/CD20~+的B淋巴细胞白血病细胞株Raji或BALL为模型,观察:(1) CART细胞胞啃发生率、胞啃发生机制;肿瘤细胞CD19/CD20抗原丢失情况;(2)利用CD20表达密度不同的肿瘤细胞为靶细胞,观察CD20 CART的细胞毒及胞啃发生率;(3)利用化学佐剂Bryostatin1处理肿瘤细胞,观察对CD20的表达及其对CART细胞细胞毒活性的影响。结果显示:(1) CD19~+/CD20~+肿瘤细胞与CD19/CD20 CART细胞共培养,检测到CD19或CD20抗原在CAR-T细胞的表达,而肿瘤细胞CD19/CD20抗原有不同程度降低。加入PICK抑制剂及肌动蛋白抑制剂可抑制胞啃发生。提示胞啃在CART治疗过程中普遍存在。(2) CD20表达密度与CART的细胞毒活性呈正相关。(3)Bryostatin1可明显上调CD20的表达。总之,胞啃导致的肿瘤细胞特异性抗原的丢失及CART细胞间的相互残杀是钝化CD20 CART细胞治疗的机制之一,Bryostatin1通过上调CD20表达,对改善CD20 CART细胞反应具有重要作用。更多还原