蒲公英甾醇抗肿瘤及免疫调节作用及其机制初探

【作者】 张瑜； 任峰； 杨莹莹； 秦原华；

【机构】 新乡医学院基础医学院； 新乡医学院护理学院；

【摘要】 背景:肝细胞癌是最常见的恶性肿瘤之一,其起病隐匿,多数患者就诊时已是中晚期,错失手术最佳治疗时期,加之较高的肝外转移、术后复发和化疗药物严重的毒副作用等,肝癌患者5年生存率依然较低。免疫系统是机体抵御疾病的第一大防线,对肿瘤细胞的识别和清除过程中发挥着重要作用。研究发现,肿瘤患者存在不同程度的免疫功能低下。增强机体免疫功能是重要的抗肿瘤机制之一。研究表明,许多传统中草药能增强免疫功能,对肿瘤有治疗效果。我们前期发现,蒲公英提取物具有明显的抑瘤活性。蒲公英甾醇(Taraxasterol,TS)是蒲公英提取物的主要活性成分之一,具有明确的分子结构。TS是由羟基化的多环异戊烯衍生而来,具有1,2-环戊烯菲结构,是一种五环三萜类化合物。另外,TS在体内外显著抑制了肝癌细胞的增殖,同时促进了肝细胞癌荷瘤小鼠的免疫调节作用,提高机体对肿瘤的免疫应答。目的:通过体内外实验探究TS的抗肿瘤及其免疫调节作用,并明确其相关机制,为TS的临床应用提供理论和实验依据。方法:1.体外实验明确TS对肝癌细胞的作用:不同浓度的TS处理HepG2细胞,CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;Western Blot检测凋亡相关蛋白的表达。2.体内实验检测TS对肝细胞癌荷瘤小鼠的作用:构建肝细胞癌荷瘤小鼠模型,不同剂量的TS对小鼠灌胃14天。14天后处死小鼠,取肿瘤组织和脾脏。免疫荧光检测肿瘤组织CD3~+、CD4~+、CD8~+T细胞浸润情况;免疫组化检测肿瘤组织中KI67的表达;流式细胞术检测脾脏细胞中T淋巴细胞亚群分布情况;Western Blot检测凋亡相关蛋白和IL-6、p-STAT-3、JAK-2的表达。结果:1.体外实验证明TS能明显抑制肝癌细胞的增殖,并呈浓度及时间依赖性。2.体内实验证明与对照组相比,TS组明显减慢了肝细胞癌荷瘤小鼠的肿瘤生长速度,增加了小鼠脾脏细胞中CD4~+T细胞的比例,增加了小鼠肿瘤组织中CD4~+、CD8~+T细胞的浸润。3.其抗肿瘤作用机制可能与阻滞细胞周期和诱导肿瘤细胞凋亡相关,其免疫调节作用可能与IL-6/JAK/STAT-3信号通路相关。结论:蒲公英甾醇能够在体内外抑制肝细胞癌的增殖,增加荷瘤小鼠T细胞数量,并主要通过上调CD4~+T细胞促进抗肿瘤免疫功能,为临床治疗肝细胞癌提供了新思路。更多还原