肝脏特异性敲除Nnmt减缓非酒精性脂肪炎的进展

【作者】 洪尚宇； 李丹丹；

【机构】 复旦大学生命科学院；

【摘要】 目的肝脏烟酰胺N-甲基转移酶(Nnmt)的表达受饮食营养调控并在肝脏糖脂代谢调控中发挥着重要的作用。此前有研究表明Nnmt在酒精性脂肪肝的发生发展过程中扮演重要角色,酒精喂食的小鼠肝脏中Nnmt表达量升高,而敲低肝脏Nnmt能够延缓小鼠酒精肝的形成,减轻酒精摄入引起的肝脏损伤。但是Nnmt在非酒精性脂肪炎上的作用未知。另外,此前研究肝脏Nnmt功能均采用病毒递送的shRNA特异性敲低Nnmt。此技术手段有其局限性。方法为了研究肝脏Nnmt在非酒精性脂肪肝炎发生发展中的功能,我们构建了Nnmtflox/flox小鼠,并通过与Alb-cre小鼠杂交得到肝脏特异性敲除Nnmt小鼠(Nnmt-LKO)模型。在Nnmt-LKO小鼠及其同窝野生型小鼠基础上采取腹腔注射四氯化碳,饮用水中加入葡萄糖和果糖和饲喂西方饮食的方法建立非酒精性脂肪炎模型。结果我们首先检测了模型小鼠中的血脂情况,实验结果显示在Nnmt-LKO小鼠血清中总胆固醇含量、低密度脂蛋白含量均显著降低;接着,我们检测了肝损伤的标志物丙氨酸氨基转移酶含量和天冬氨酸氨基转移酶含量,结果显示Nnmt-LKO小鼠血清中二者水平均显著降低,提示Nnmt-LKO的肝脏损伤较小;进一步分析发现,Nnmt-LKO小鼠的肝重显著降低,肝脏的炎症和纤维化水平也显著降低,显示Nnmt-LKO小鼠的非酒精性脂肪肝炎进展被延缓;提取Nnmt-LKO和野生型小鼠的原代肝细胞,使用油酸和棕榈酸处理后,Nnmt-LKO的肝细胞积累更少的脂质含量,且脂质合成相关基因显著下调,提示Nnmt-LKO肝细胞抑制了酒精引起的肝脏脂肪代谢失调,从而延缓脂肪肝的形成。结论综上,我们的实验结果表明肝脏特异性敲除Nnmt可以减缓非酒精性脂肪炎的进展从而降低肝损伤。Nnmt是肝脏代谢性疾病的重要靶点基因之一。更多还原