牛磺酸促进线粒体自噬调控M2型巨噬细胞极化

【作者】 陈成英； 蓝春花； 袁江浪； 孔星星； 蓝利； 王新航； 常升搏小吉； 陆彩铃； 唐深； 李习艺；

【机构】 广西医科大学基础医学院； 广西医科大学广西高校基础医学研究重点实验室； 广西医科大学公共卫生学院；

【摘要】 目的牛磺酸作为条件必须氨基酸在人体内广泛存在,具有抗炎和免疫调节的功能。巨噬细胞是介导机体炎症反应的重要免疫细胞,具有高度异质性。有研究报道,牛磺酸能够抑制巨噬细胞分泌炎症因子抑制炎症,目前牛磺酸调控巨噬细胞的具体分子机制尚不明确。本研究的目的是初步探索牛磺酸对M2型巨噬细胞抑炎极化的调控作用,以及线粒体自噬在其中的作用机制。方法体外培养的人单核细胞系THP-1细胞分为3组。M0型巨噬细胞组:THP-1细胞经100nmol/L佛波酯处理48h后诱导分化为M0型巨噬细胞;M2型巨噬细胞组:M0型巨噬细胞经20ng/mL白细胞介素4(IL-4)刺激48h诱导极化为M2型巨噬细胞;牛磺酸处理组:在M2组的基础上,加入牛磺酸与IL-4共处理48h。实时荧光定量PCR检测M2型巨噬细胞极化相关标志物:甘露糖受体(MRC-1)、细胞趋化因子(CCL-22)、DC特异性细胞间黏附分子3结合非整合素(CD209)的mRNA表达水平;荧光酶标仪及激光共聚焦显微镜检测和观察线粒体、溶酶体数量变化及JC-1线粒体膜电位(MMP)水平;Western blot法检测线粒体自噬相关蛋白PINK1、LC3表达水平。结果 M0极化为M2时,M2型极化相关标志物MRC-1、CCL-22、CD209 mRNA表达水平明显上升;线粒体数量增加,溶酶体数量减少;MMP增加;线粒体自噬相关蛋白PINK1蛋白表达水平增加,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ下降。40和80mM牛磺酸分别干预后,M2型极化相关标志物MRC-1、CCL-22、CD209的mRNA水平明显下降;线粒体数量减少,MMP下降;溶酶体数量增加;PINK1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平增加,且降幅/升幅均与牛磺酸浓度呈剂量关系。结论牛磺酸可能通过降低线粒体膜电位,促进线粒体自噬水平,减少细胞的线粒体数量,抑制M2型巨噬细胞极化相关标志物的表达,负调控M2型巨噬细胞极化,避免过度抑炎极化。更多还原