日本脑炎病毒在PK15细胞上膜受体的鉴定

【作者】 魏建超； 史子学； 邵东华； 王少辉； 李蓓蓓； 马志永； 陈溥言；

【机构】 中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生研究室； 南京农业大学动物医学院；

【摘要】 <正>引言病毒与细胞表面受体的相互作用是决定病毒嗜性的重要因素。日本脑炎是由日本脑炎病毒引起的人畜共患病,猪是JEV的中间扩增宿主。目前,JEV在猪源细胞上受体分子仍不清楚。曾经有文献报道Vero细胞膜上一个74 kDa分子可能参与JEV的入胞过程。最近,又有两篇文献报道相对分子质量约70kDa的热休克蛋白一族(Hsc 70)可能是JEV在C3/36细胞和小鼠神经母细胞瘤(Neuro2a)细胞上的受体候选分子。JEV在猪源细胞上的受体是否也是Hsc 70,或是还存在其它蛋白?因此,本研究选择PK15细胞为主要的研究对象,同时选用Vero和BHK-21细胞,应用病毒铺覆蛋白结合试验(VOPBA)并结合免疫印迹化学发光方法对PK15细胞膜受体进行鉴定,继而用抗体阻断试验对受体候选分子进行了初步验证,并用激光共聚焦技术(LSCM)观察候选受体分子在细胞膜上的定位,从而为进一步深入阐明JEV的致病的分子机理,探寻新的防治策略提供实验依据。更多还原