蛋白-蛋白相互作用的单细菌水平肽类抑制剂筛选

【作者】 邓敏芳； 吴丽娜； 苏柳钦； 洪歆怡； 颜晓梅；

【机构】 化学生物学福建省重点实验室谱学分析与仪器教育部重点实验室厦门大学化学化工学院；

【摘要】 细菌双杂交系统（BACTH）广泛应用于蛋白质相互作用研究。通过BACTH系统和纳米流式检测技术的有机结合,通过对报告因子和相互作用蛋白的双荧光同时检测,我们课题组发展了蛋白质相互作用的单细菌水平检测方法,具有快速、灵敏、高通量等优点。我们还提出应用相对报告因子表达量（RRPE）即单位相互作用蛋白表达所产生的报告基因表达量对蛋白质相互作用强度进行定量分析的方法^[1]。本研究利用所建立的蛋白质相互作用定量分析方法,对蛋白质相互作用的肽类抑制剂进行筛选。我们以相互作用蛋白对Pal-TolB为模型,考察短肽TBE对其相互作用的抑制作用。TBE和TolB的相互作用结构域与Pal相同,能够与Pal竞争结合TolB,进而抑制Pal-TolB相互作用^[2]。利用纳米流式检测技术（nFCM）,通过检测TBE加入前后RRPE的变化,我们实现了对Pal-TolB相互作用肽类抑制剂的抑制作用分析。基于RRPE-BACTH系统,我们发展了一种快速、便捷、高通量的蛋白质相互作用抑制剂筛选方法,有望为药物的研发和筛选提供有利指导。更多还原