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基于聚集诱导发光和无模板DNA聚合的DNA甲基转移酶活性检测
【机构】 肿瘤标志物传感器分析重点实验室青岛科技大学化学与分子工程学院;
【摘要】 提出了一种基于聚合诱导发光(AIE)和目标引发的无模板DNA聚合的DNA甲基转移酶(MTase)活性检测方法。以四苯基乙烯季铵盐为AIE探针,可通过静电作用与DNA单链结合。设计了一种具有特定序列的DNA MTase发夹探针。在DNA MTase缺失的情况下,AIE由于猝灭基团存在,使荧光强度较低。在DNA MTase存在下,甲基化反应借助末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)启动DNA聚合,激活荧光强度,具有AIE效应。基于AIE效应,所研制的DNA传感器对Dam MTase浓度的线性响应范围为0.5 U/mL~100 U/mL,极限检测为0.16 U/mL。此外,本实验还显示了在稀释的人血清中的潜在应用,以及评价5-氟尿嘧啶作为Dam MTase抑制剂的价值.
【基金】 中国国家自然科学基金(21705086,21705086);山东省重点实验室开放基金的肿瘤标志物的检测技术(KLDTTM2019-6)等项目的资助和大力支持
- 【会议录名称】 第十一届全国化学生物学学术会议论文摘要(第二卷)
- 【会议名称】第十一届全国化学生物学学术会议
- 【会议时间】2019-11-18
- 【会议地点】中国广东广州
- 【分类号】O657.3;Q503
- 【主办单位】中国化学会化学生物学专业委员会