【作者】 汤优； 杜兴媛； 刘艳； 米真真； 张标； 吴韶华； 孙建军；

【Author】 You Tang;Xing-Yuan Du;Yan Liu;Zhen-Zhen Mi;Biao Zang;Shao-Hua Wu;Jian-Jun Sun;Ministry of Education Key Laboratory for Analytical Science of Food Safety and Biology, College of Chemistry, Fuzhou University;

【机构】 福州大学化学学院食品安全与生物分析教育部重点实验室；

【摘要】 以金盘热电极为基底,在金盘热电极表面修饰一条带巯基的捕获探针DNA（CP）,目标DNA（TP）的一端与固定在电极表面的CP互补,另一端与末端标记了生物素的信号探针DNA（SP）互补,形成三明治结构。标记有生物素的SP与耦合了辣根过氧化物酶（HRP）的链霉亲和素发生特异性结合。通过调控电极温度,研究不同温度下HRP的催化活性,实现对TP的高灵敏度检测。实验结果表明,当温度升至40℃,TP检出限LOD可以达到3.3×10^-13 mol·L^-1,比0℃时降低了一个数量级。表明升高温度可提高HRP的电催化活性,从而实现对目标DNA的高灵敏检测。更多还原

【Abstract】 The DNA capture probe （CP）,labeled with a thiol group at the 5-end,was immobilized on the gold disc heated electrode through S-Au bonding.The target DNA （TP） could hybridize with CP and signal probe DNA （SP） labeled with a biotin at the 3-end,fianally a sandwich structure could be formed.Horseradish peroxidase connected with streptavidin （streptavidin-HRP） could attach to the biotinylated SP firmly through the specific interaction between biotin and streptavidin.Under the optimized experimental conditions,with an electrode temperature of 40℃,a detection limit of 3.3×10^–13 mol·L^–1 could be obtained for the target DNA detection,which was one magnitude lower than that at 0℃,indicating that the elevated electrode temperature could greatly increase the sensitivity of the electrochemical DNA sensor.更多还原