羊吕氏泰勒虫PCR检测方法的建立与应用

【作者】 闫亚群； 崔艳艳； 王晓星； 赵姗姗； 张艳； 史柯； 菅复春； 王荣军； 张龙现； 宁长申；

【机构】 河南农业大学牧医工程学院；

【摘要】 为建立一种准确、敏感的羊吕氏泰勒虫检测方法,根据GenBank上发表的羊吕氏泰勒虫18S rRNA基因序列（登录号:KC735166.1）,设计1对特异性引物,建立了PCR检测方法。筛选该方法的最佳反应条件及体系,并进行了敏感性、特异性、重复性试验及临床血液样品检测。结果表明,该方法能扩增出大小为962 bp的羊吕氏泰勒虫特异性片段,与GenBank收录的相关参考序列同源性高达99.4%～99.9%;与绵羊泰勒虫、尤氏泰勒虫、环形泰勒虫、莫氏巴贝斯虫和弓形虫基因组DNA均无交叉反应;DNA最低检测量为29.13 fg·μL^-1;具有良好的重复性;对76份羊临床血液样品检测结果表明,羊吕氏泰勒虫感染率为77.63%,高于已报道的常规PCR检测结果。更多还原