沃尼妙林残留检测方法及在蛋鸡体内残留标示物的探究

【作者】 孙菲菲； 肖红芝； 孙攀； 王建中； 邱基程； 张素霞； 曹兴元；

【机构】 安徽农业大学动物科技学院； 中国农业大学动物医学院；

【摘要】 [目的]本研究旨在建立沃尼妙林在鸡肌肉、肝脏、肾脏、肺脏、脂肪和鸡蛋中的超高效液相色谱串联质谱检测方法,并开展沃尼妙林在蛋鸡体内的残留消除规律研究。[方法]称取2g匀浆后的组织,加入15mL乙腈与0.01MHCl (8:2,v/v),涡动后离心收集上清液,然后加入等体积的正己烷除脂后取上清液经HLB固相萃取柱进行净化,HLB萃取柱依次采用3 mL甲醇,3 mL水,3mL乙腈与0.01M HCl (8:2,v/v)进行活化平衡,样本过柱后依次用3mL水,3mL淋洗液进行淋洗,最后用2 mL 5%氨甲醇将待测物洗脱液出来,洗脱液由氮气吹干后复溶至1mL初始流动相中,过0.22μm滤膜待进质谱分析。色谱条件:Phenomenex色谱柱(50 mm×2.1 mm i.d.,1.8μm),流动相A为0.1%甲酸水溶液,B为0.1%甲酸乙腈溶液,流速:0.3 mL/min,梯度洗脱程序为0-1 min,25%B;1-5min,35%B;5-5.5 min,60%B;5.5-6 min,100%B;6-6.5 min,25%B;6.5-7 min,25%。质谱条件:在ESI+条件下采用多反应监测模式采集数据,毛细管电压为3.2 kV;脱溶剂气体流速750L/h;离子源温度为120℃;脱溶剂温度350℃;定性、定量离子对分别是m/z565.0>m/z163.5和m/z565.0>m/z263.2。[结果]沃尼妙林在六种不同组织中的检出限和定量限均定为2和5μg/kg,在三个添加浓度(10,500,2000μg/kg)的平均回收率在78.8-100.4%,日间和日内变异系数均不大于13.9%。沃尼妙林在鸡蛋中含量最高,其次是肺脏、肝脏、肾脏、在脂肪和肌肉,在脂肪和肌肉中的含量很低。[结论]本研究中建立的分析方法能满足生物样本分析方法的要求,可用于开展沃尼妙林在鸡体内的残留消除规律研究。依据沃尼妙林在鸡各组织中的残留消除规律,将沃尼妙林在蛋鸡的休药期推荐为1天。更多还原