甜瓜黄萎病病原鉴定

【作者】 何苏琴； 文朝慧； 白滨； 荆卓琼； 李青青；

【机构】 甘肃省农业科学院植物保护研究所； 农业部天水作物有害生物科学观测实验站； 甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心； 甘肃省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所； 农业部农产品质量安全风险评估实验室(兰州)；

【摘要】 大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)是一种寄主范围广泛的植物病原菌,可以侵染数百种有经济价值的植物,包括观赏花卉(松果菊coneflower,大丽菊dahlia)、蔬菜(马铃薯potato,莴苣lettuce)、纤维作物(棉花cotton)、精油和调料作物(薄荷mint,月桂bay)、浆果(树莓raspberry,草莓strawberry)、果树(阿月浑子树pistachio,橄榄树olive)和观赏树木(枫树maple,黄栌smokebush)等。由于大丽轮枝菌V.dahliae和黑白轮枝菌V. albo-atrum的为害,每年可导致全球数十亿美元的农作物损失。虽然大丽轮枝菌引起的植物黄萎病在全球分布广泛,但甜瓜黄萎病仅在地中海地区、欧洲和北美洲有发生报道[1-3]。2013年11月在甘肃省兰州市皋兰县的日光温室秋冬茬甜瓜种植棚内,发现了黄萎症状的甜瓜植株,病株率约为1%。病株叶片黄化、叶缘V字形坏死、叶片萎垂,茎部维管束呈淡黄褐色,根部无明显根腐症状。从4个病株的茎组织中分离得到轮枝菌属真菌8株,轮枝菌属真菌的病株分出率达100%。病菌分生孢子单细胞,无色,卵圆形、长椭圆形或杆状;分生孢子梗无色,直立或匍匐生长,单生、对生或1至多层轮生,每层轮枝上可生3-6个小梗,少数生侧枝;小梗为细长的瓶梗;微菌核黑色,葚孢型。2个代表性菌株GLTG-2和GLTG-5(显微特征相似但菌落形态和生长速率不同),在温度18-24℃及昼/夜光周期为11.5 h/12.5 h的试验条件下,采用胚根接种法[4]人工接种可引起甜瓜苗矮化、枯萎:接种后40 d,枯萎(死)株率分别为70%和40%,对照未发病;洗根检查发现,接种处理甜瓜的根呈不同程度的黄褐色;接种处理植株根部原接种菌的分出率达80%-100%。BLASTn分析结果显示,菌株GLTG-2的rDNA-ITS序列(GenBank Accession No. MK252095)与V. dahlia菌株MRHf7(GenBank Accession No. MK093977.1)的序列同源性达99.78%,菌株GLTG-5的rDNA-ITS序列(GenBank Accession No. MK252096)与V. dahlia菌株MRHf7和Vd414(GenBank Accession No. MH392569.1)的序列同源性达100.00%。经病原菌分离、科赫氏法则证病,及病原菌形态学和分子生物学鉴定,将引起甜瓜黄萎病的病原菌鉴定为大丽轮枝菌V. dahlia。这是大丽轮枝菌引起甜瓜黄萎病在我国和亚洲地区的首次报道。更多还原