西沙群岛草海桐叶缘枯病病原菌鉴定

【作者】 王义； 李敏； 张绍刚； 高兆银； 洪小雨； 李春霞； 弓德强； 赵超； 胡美姣；

【机构】 海南大学生命科学与药学院； 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业农村部热带作物有害生物综合治理重点实验室；

【摘要】 草海桐属多年生常绿亚灌木滨海植物,是我国西沙群岛主要的原生植物之一,其对防风固沙和修复退化的热带海岛生态系统具有重要作用,近年来也作为绿化观景植物广泛种植于海滨一带。2018年5月--2019年6月,项目组对西沙群岛植物病害调查时发现草海桐叶缘坏死,且在老熟叶片上常见。该病发病初期叶缘淡黄色水渍状,病斑常沿中脉扩展,病健交界部位黄色,受害部位黄褐色或褐色坏死,有时生黑色小点。从病部分离获得一致分离物ZD51。采用刺伤接种法,接病原菌于健康草海桐叶片上,24 h即出现水渍状失绿,48 h后逐渐变褐,形成近圆形、椭圆形、梭形病斑,3 d后病斑处密生黑色小颗粒状的分生孢子器。从接种发病组织中的分离物与ZD51形态一致。ZD51菌落生长快,气生菌丝发达,初期基质、菌丝和气生菌丝均为白色,5-6 d气生菌丝变为浅灰黑色,21 d后培养基上产生呈黑色颗粒状的分生孢子器,圆球形或梨形,直径245.6μm-418.2(289.3)μm,分生孢子梗无色透明,着生在分生孢子器内壁上,短棒状,有隔,顶端略尖,分生孢子纺锤形至椭圆形、薄壁、单胞,大小12.5-21.5(17.3)μm×4.6-7.0(5.7)μm (n=100)。根据病原菌的培养性状和形态学特征,参照真菌分类相关文献的描述,初步鉴定该病原菌为壳梭孢(Neofusicoccum sp.)。对ZD51菌株ITS、EF-1α和β-tubulin基因序列进行扩增,分别获得566 bp、860 bp和451 bp序列,于NCBI网站上Blast比对分析,发现所得序列与小新壳梭孢菌(Neofusicoccum parvum)的相关基因序列相似性分别达到98.59%、98.28%、98.86%,下载相关序列,按顺序合并序列,构建系统发育树(Neighbor-joining),进一步确定了西沙群岛草海桐叶缘枯病的病原菌为小新壳梭孢菌(Neofusicoccum parvum)。更多还原