热休克蛋白90参与人精子获能相关事件

【作者】 李坤； 薛亚梅； 陈爱君； 蒋幼芳； 谢海锋； 石其贤； 张松英； 倪崖；

【机构】 浙江省医学科学院药物所生殖生理学实验室； 浙江大学医学院附属邵逸夫医院生殖中心；

【摘要】 目的:热休克蛋白90 (Hsp90)在细胞蛋白成熟、信号转导、蛋白折叠、蛋白降解和形态进化等方面发挥重要功能,然而Hsp90在人精子内的作用尚不完全清楚。因此,本研究目的是为了探讨Hsp90在人精子中作用及其可能机制。方法:运用间接免疫荧光染色检测Hsp90在人精子内定位表达情况,用免疫印迹分析评价Hsp90表达及蛋白酪氨酸磷酸化水平;通过多功能酶标仪监测负载荧光染料Fluo-3AM的精子观测胞内钙水平变化,运用金霉素荧光染色和计算机辅助精子分析分别评价精子获能、检测超激活运动和活力。结果:发现Hsp90主要定位在人精子颈部、中段和尾部,其表达随着获能时间延长而增加;特异抑制剂格尔德霉素抑制获能期间Hsp90表达,增强包括Hsp90在内的蛋白酪氨酸磷酸化;第一次观察到格尔德霉素可明显降低人精子获能期间的胞内钙浓度;格尔德霉抑制人精子孕酮刺激的获能、超激活运动和活力。结论:结果表明Hsp90在人精子胞内钙平衡、蛋白酪氨酸磷酸化调节及孕酮刺激的精子功能等获能相关事件中发挥重要作用,为Hsp90在精子中有何作用提供了新的理解。更多还原