牦牛流产衣原体灭活苗的研究及本动物免疫试验

【作者】 赵荣； 阚威； 李兆才； 晁宜林； 娄忠子； 蔡金山； 周继章；

【机构】 家畜疫病病原生物学国家重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所； 青海省动物疫病预防控制中心；

【摘要】 通过对分离的牦牛流产衣原体(GN-6株)进行鸡胚增殖、灭活、乳化等措施制备成灭活疫苗,疫苗制备完成后,本研究对该疫苗进行了免疫效果评价。将制备好的牦牛流产衣原体疫苗,皮下接种于6-8周龄的BALB/c小鼠,免疫后21天采集血清,进行免疫抗体、抗体亚型、IFN-γ含量检测、中和抗体、迟发型超敏反应等的检测,接下来采用该疫苗进行了本动物免疫保护性研究。结果显示,免疫小鼠的抗体亚型测定结果以IgG1型、κ链轻链为主,说明该疫苗在免疫小鼠体内诱导了Th2型体液免疫应答,对抵抗衣原体感染起到一定作用。同时,研究结果还表明,再经过该疫苗免疫之后,小鼠血清中的细胞因子IFN-γ含量明显升高;在DTH检测中小鼠试验足足垫增厚明显;表明免疫小鼠体内产生了Th1型细胞免疫应答,对衣原体感染后的有效清除起到一定作用。抗体中和试验结果显示,疫苗免疫组形成包涵体的数量小于对照组,血清中形成了能够中和衣原体的保护性抗体;攻毒试验结果表明,免疫组小鼠脾脏重量低于对照组,提取基因组DNA后对helicase gene clone 8基因进行PCR扩增,免疫组结果显示为阴性,说明免疫组小鼠有效抵抗了衣原体的感染,本研究所生产的疫苗起到了保护作用。疫苗对本动物的保护性试验结果显示:实验组牦牛均未发生流产,保护率为100%,对照组流产率为73.3%。此外,疫苗的抗体动态水平检测结果显示:疫苗免疫后210天时平均免疫抗体滴度保持在1:856,疫苗免疫效果理想。以上试验结果表明所有的实验组小鼠和牦牛均得到了保护,表明本研究研制的灭活疫苗能够有效抵抗牦牛流产衣原体的攻击。更多还原