菊花WRKY家族基因的克隆及表达分析

【作者】 宋爱萍； 李佩玲； 蒋甲福； 陈素梅； 李会云； 曾俊； 邵亚峰； 朱璐； 张兆和； 陈发棣；

【机构】 南京农业大学园艺学院；

【摘要】 通过转录组序列分析和RACE-PCR的方法克隆了15个菊花WRKY转录因子基因,并比较了它们和模式植物拟南芥同源基因在序列和表达模式上的差异,结果表明在寻找菊花CmWRKY在拟南芥中的同源基因时,局部比对策略比全局比对策略更好。表达分析表明15个CmWRKY基因在特定器官中的表达水平差异很大,部分基因的表达具有组织特异性。并研究了其受NaCl、PEG、冷、热激、机械伤害等非生物胁迫,接种死体营养型病原菌Alternaria tenuissima、半活体营养型病原菌Fusarium oxysporum、活体营养型病原菌Puccinia horiana、蚜虫等生物胁迫和脱落酸、茉莉酸甲酯、水杨酸等外源激素处理下的表达模式。亚细胞定位分析表明15个CmWRKY蛋白均定位于细胞核中,转录激活活性分析表明CmWRKY7、10和11具有较强的转录激活活性,CmWRKY4和9具有较弱的转录激活活性,而其余10个CmWRKY均无转录激活活性。本实验结果可以为下一步对CmWRKY的功能研究提供参考,最终将为菊花及其他作物农艺性状的遗传改良提供基因资源。另外,本研究还筛选出了受尖孢镰刀菌(F.oxysporum)诱导表达的3个CmWRKY候选基因为CmWRKY1、6和8,为研究CmWRKY基因在连作条件下参与植物-病原物互作机制奠定了基础。更多还原