PITX1诱导胃癌细胞凋亡的分子机制研究

【作者】 乔凤昌； 张坤； 苏献伟； 王玲； 吴华彰； 公丕海； 樊红；

【机构】 "发育与疾病相关基因"教育部重点实验室东南大学生命科学研究院； 哈尔滨医科大学附属第三医院(哈尔滨医科大学附属肿瘤医院)； 东南大学医学院；

【摘要】 PITX1为同源盒基因家族的成员,参与肢体及器官的发育和生物体左右对称的维持。近年研究发现,PITX1与一些肿瘤的发生发展有一定的关系。PITX1在胃癌中的调控机制及参与胃癌发生发展的作用并不清楚,对其研究将为胃癌发病机制的探讨和胃癌的分子治疗提供实验基础。本研究在胃癌临床病例中的表达分析结果发现,Pitx1在肿瘤组织中低表达,但胃癌细胞系的研究未检测到该基因的低表达受DNA甲基化及组蛋白乙酰化的影响。进一步应用mi RNAmicroarray筛查及靶标基因的预测,获得可能调控Pitx1的候选mi RNA:mi R-30a/b-5p、mi R-19a/b-3p。q PCR检测mi R-30a/b-5p在胃癌组织中的表达及与PITX1表达的相关性,发现mi R-30a/b-5p与Pitx1的表达水平无相关性或呈正相关,未提示mi R-30a/b-5p与Pitx1存在可能的靶向关系。双荧光素酶报告系统分析了获选mi RNA分子mi R-19a/b-3p与PITX1的靶向关系,结果显示mi R-19a-3p能靶向结合PITX1的3’-UTR区而影响PITX1的表达,而mi R-19b-3p靶向结合PITX1的能力较弱。mi R-19a-3p靶向结合PITX1下调了其在m RNA和蛋白水平的表达,提示mi R-19a-3p在转录及翻译水平均能抑制Pitx1表达。为了探讨Pitx1在胃癌中低表达的生物学意义,本研究进一步分析了PITX1对胃癌细胞系恶性增殖的影响。结果表明,PITX1的导入明显抑制了胃癌细胞系的细胞增殖,且导致癌细胞G1/S期阻滞,随后48hr细胞出现明显的凋亡现象。ChIP-seq的结果显示PITX1可能作为转录因子结合一些凋亡相关的基因并调控其表达,引起细胞凋亡。以上研究结果将为PITX1参与胃癌凋亡信号通路的研究提供新的观点,并为胃癌的治疗提供新的靶点。更多还原