苯肾上腺素上调LIS1/PCNA促进颌下腺131I损伤后修复

【作者】 王馨悦； 于璟； 张福胤； 向彬；

【机构】 大连医科大学附属第二医院口腔颌面疾病研究所； 大连医科大学附属第二医院核医学科； 大连医科大学附属第二医院口腔颌面外科；

【摘要】 目的:放射性碘(131I)消融治疗是分化型甲状腺癌术后重要的治疗手段,但唾液腺不可避免地会受到131I的辐射损伤。基于干细胞的再生疗法可有效缓解放射性涎腺炎,但激活腺体自身内源性干细胞尚未见报道。微管动力调节蛋白(lissencephaly-1,LIS1)是新的干细胞调节因子,在神经干细胞和肝造血干细胞中发挥极重要的作用。我们前期研究发现苯肾上腺素(phenylephrine,PE)可通过上调大鼠颌下腺中的LIS1蛋白改善131I所致大鼠颌下腺辐射损伤,推测LIS1可能在唾液腺辐射损伤的干细胞调控中发挥重要作用。因此,我们拟通过免疫荧光双重染色分析LIS1和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的共表达及共定位,以明确PE激活辐射损伤后腺体自身内源性干细胞的保护机制。方法:24只Wistar大鼠随机分为四组(每组6只):空白对照组、单纯PE组(腹腔注射PE5 mg/kg)、单纯131I组(腹腔注射131I 0.5 mCi/100g)和PE预处理组(给予131I前半小时腹腔注射PE)。给予131I后第7天麻醉下取颌下腺,制成5 mm石蜡切片,使用常规免疫组织化学荧光法染色,利用不同源性的一抗及相应荧光二抗分别标记LIS1(FITC)和PCNA(Cy3)蛋白。结果:LIS1主要定位于颌下腺的颗粒曲管和导管细胞的胞浆中,且131I使LIS1蛋白的荧光强度降低,PE预处理后可减轻LIS1蛋白荧光的降低程度;PCNA定位于颌下腺颗粒曲管和导管细胞的胞核中,PE预处理可显著提升131I辐照后PCNA的荧光强度,更重要的是,PCNA与LIS1蛋白存在明显的共定位。结论:PE可能通过同时上调导管细胞中LIS1和PCNA水平而促进131I损伤颌下腺细胞内源性干细胞增殖,促进腺体131I辐射损伤后自我更新。更多还原