代综方通过抑制肝脏notch信号通路改善db/db小鼠胰岛素抵抗

【作者】 朱莉莉； 朱晓云； 刘喜明；

【机构】 中国中医科学院广安门医院；

【摘要】 目的研究中药复方代综方对自发性2型糖尿病db/db小鼠胰岛素抵抗的作用及肝脏Notch信号通路的相关机制。方法 6周龄雄性C57BL/Ksj-db/db小鼠50只根据血糖和体重随机分为5组,经灌胃给予不同浓度代综方提取物(0.5g/kg,1g/kg和1.5g/kg),阳性对照组给予二甲双胍(250mg/kg),空白对照组(10只同窝阴性小鼠)及模型组给予同体积蒸馏水。给药12周,每日监测小鼠饮食量,每周测定小鼠体重及空腹血糖,实验结束前行口服葡萄糖耐量(OGTT)及胰岛素耐量(ITT)试验,ELISA试剂盒测定血清空腹胰岛素(FINS)水平并计算胰岛素抵抗稳态模型(HOMA-IR)。此外,全自动生化仪测定血清肝功能,肝组织行HE及油红O染色,试剂盒检测肝内甘油三酯水平,Western blot检测肝脏AMPK、Notch1、Hes1等蛋白表达。结果与模型组相比,二甲双胍及代综方对db/db小鼠饮食量和体重未见显著影响(P>0.05),二甲双胍与代综方各剂量组均可显著降低OGTT、ITT曲线下面积(P<0.05),代综方可明显降低血清胰岛素及HOMA-IR水平(P<0.001),改善胰岛素抵抗。此外,试剂盒测定及油红O染色显示,代综方各剂量组均可减少肝内脂质沉积(低中剂量P<0.05,高剂量P<0.01);肝内ALT、AST水平与模型组相比明显降低(P<0.05)。Western Blot显示,二甲双胍及代综方均可促进肝内AMPK磷酸化(P<0.05)及Akt磷酸化(P<0.05);与模型组相比,db/db小鼠肝脏内活化的Notch1和Notch信号通路的下游靶蛋白Hes1蛋白高表达(P<0.01),而二甲双胍及代综方给药组可显著降低Notch1和Hes1的表达(P<0.01)。结论代综方具有改善糖脂代谢紊乱的作用,在改善胰岛素抵抗方面具有突出作用,而抑制肝脏Notch信号通路的过表达是代综方的作用机制之一。更多还原