断乳至性成熟期赤霉素GA3暴露对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响

【作者】 郭毅炜； 申琪； 管芳圆； 郭雨柔； 陈益钦； 徐飞飞； 王文祥；

【机构】 福建医科大学公共卫生学院；

【摘要】 目的探讨断乳至性成熟期间持续暴露赤霉素GA3对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响,为赤霉素的卵巢发育毒性提供科学实验依据。方法 44只清洁级21日龄刚断乳雌性Wistar大鼠适应性喂养后,按体重随机分成4组,以0,50、100、200mg/kg赤霉素灌胃干预至56日龄(性成熟)。干预结束后取卵巢称重并计算其脏器系数;HE染色观察卵巢组织学变化并计算各级卵泡构成比;电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构及其凋亡情况;TUNEL法定量检测卵巢细胞凋亡情况;进一步采用Real-time PCR法检测细胞凋亡相关基因caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bcl 2、Bax、Fas的mRNA表达。结果(1)与对照组相比,低、中、高剂量GA3组有腔卵泡构成比降低,中、高剂量组闭锁卵泡构成比升高,低剂量组黄体构成比上升而中剂量组黄体构成比降低,差异均具有统计学意义(P<0.001)(2)电镜结果显示中剂量组可见部分颗粒细胞染色体凝聚,高剂量组中可见核固缩和凋亡小体。(3)TUNEL结果显示,与对照组相比,中、高剂量组的卵巢颗粒细胞凋亡率显著增加(P<0.05)(4)Real-time PCR结果显示,与对照组相比,中、高剂量组caspase-3及caspase-8的mRNA水平上调(P<0.05,P<0.01),高剂量组caspase-9及Fas的mRNA表达升高(P<0.05)。结论断乳至性成熟间持续暴露赤霉素GA3后可诱发大鼠卵巢颗粒细胞凋亡,其机制可能与赤霉素改变凋亡相关基因的表达有关。更多还原