C57BL/6J小鼠胚胎腭突Pdgfra表达:体内及体外实验

【作者】 于果； 贾凯宁； 肖文林； 许尧祥； 岳金； 薛令法；

【机构】 青岛大学口腔医学院； 青岛大学附属医院青岛大学附属医院口腔医学中心青岛大学附属医院山东省教育厅口腔重点实验室；

【摘要】 研究目的:观察小鼠胚胎腭突体内及体外培养融合过程中PDGFR-α的时空变化特征。研究方法:C57BL/6J小鼠分别于妊娠第13.5天(GD13.5)、GD14.5、GD15.0、及GD15.5时断颈处死,取小鼠胚头及腭突,免疫组织化学及Western blot法检测不同胚胎发育时期的腭突组织中PDGFR-α的表达变化。C57BL/6J小鼠于GD13.5在体式显微镜下进行腭突取材,应用悬浮培养法培养腭突,继续培养0、24、36、48小时后,相当于体内GD13.5、GD14.5、GD15及GD15.5时,取出腭突在体视显微镜下观察并记录腭突发育情况,免疫组织化学及Western blot法检测体外培养不同时期的腭突组织中PDGFR-α的表达变化。研究结果:体内及体外培养腭突的免疫组化及Western blot检测结果均显示PDGFR-α在小鼠腭突中特异性表达:在GD13.5天时主要表达在腭突上皮,而在GD14.5、GD15.0、GD15.5时在间充质和上皮都有表达,且在GD14.5天时PDGFR-α的表达水平达到高峰,其和GD13.5、GD15.0及GD15.5蛋白表达水平相比差异有统计学意义。研究结论:系统研究了PDGFR-α在小鼠胚胎腭突发育过程中存在时空变化特征,表明PDGFR-α可能与先天性腭裂的发生相关。为后续PDGFR-α和SHH基因共同参与影响腭突融合的信号转导通路的研究打下了基础。本实验也证明通过改进的体外悬浮培养腭突方法为研究腭裂发病机制提供了一个良好的体外腭突培养模型。更多还原