‘MD-2’菠萝组培育苗中的变异研究

【作者】 李晶晶； 何业华； 张伟； 薛彪； 郝静静； 胡峰； 曾晶； 韩玉琴；

【机构】 华南农业大学园艺学院； 广东金作农业科技有限公司；

【摘要】 菠萝(Ananascomosus)种植密度大、种植周期短(1.5年),每年需要大量种苗。生产上都是采用吸芽、冠芽等芽体繁殖,繁殖系数低,容易累积和传播母体的病虫害,因而推广和应用菠萝组培快繁技术就显得十分重要。菠萝离体再生技术已较成熟,但规模性生产时有一定的变异率。为将组培苗商品性状遗传变异率控制在可接受范围,必需先摸清规模性生产情况下菠萝离体变异规律,以便建立一套较稳定有效的菠萝组培苗生产技术。‘MD-2’菠萝,商品名为金菠萝,植株高大,整株叶片呈草绿色,叶缘无刺,果形美观。在晴天采下生长健壮的‘MD-2’吸芽,从基部剥除衰老叶片后,用自来水将吸芽冲洗干净,在吸芽生长点的上方约5 cm处短截,并去除根部,用自来水冲洗干净放在培养皿中备用。在超净工作台内把洗净后的吸芽用0.1%HgCl消毒8 min,无菌水冲洗3次;再于10%NaClO消毒7 min,无菌水冲洗3次;用无菌手术刀将外植体纵切成2～4个小块,接种于MS固体培养基上进行初始诱导,约30d腋芽萌发出幼茎。将幼茎转入MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA固体培养基上进行增殖培养后,再转入MS+0.5 mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA固体培养基上进行壮苗培养,最后转入1/2MS+0.2 mg·L-1 NAA+0.2 mg·L-1 IBA固体培养基上生根。培养周期为30d,培养基均添加30g·L-1蔗糖,以7.0 g·L-1琼脂固化,pH 5.8,培养温度26～28℃,光照强度2 000 lx,光时间12 h·d-1。炼苗5 d后于2018年9月20日移栽于盛在泥土椰糠1︰1基质的营养杯中,置于广州钟落谭农科院试验基地园艺部网室中。2019年8月8日按随机区组方式对约50000株组培苗的株高、叶片数、叶长、叶宽、叶色等性状进行调查分析,共调查了2 625株。同时以吸芽繁殖苗为对照。组培苗经过约11个月的生长,平均株高28.4 cm,每株叶片18.0枚,叶长34.4 cm,宽15.2 mm,生长旺盛。由于吸芽栽植时已达40～50 cm,从生长量无法与组培苗比较。调查2 625株组培苗表型性状,其中111株发生变异,表现为整株整片叶有刺(叶缘锯齿)和叶片变薄,变异率为4.2%;未发现其他明显变异。进一步的栽培试验表明,用这种有刺的组培苗的吸芽进行繁殖后,有剌性状通常又会消失,说明组培苗有刺变异可能是一种饰变而不是DNA水平变异,其机制有待进一步研究。本试验"以芽繁芽"形式进行,4%左右变异率与香蕉等植物组培苗生产中产生的变异率相近。更多还原