基于OH-BBN大鼠膀胱癌模型探讨猪苓多糖联合BCG的免疫调节作用

【作者】 周昌园； 谭庆龙； 刘春萍； 徐雯星； 罗敏； 张娴； 曾星；

【机构】 广州中医药大学第二附属医院；

【摘要】 目的研究猪苓多糖联合BCG治疗OH-BBN大鼠膀胱癌对天然免疫与适应性免疫的影响,为探讨猪苓多糖协同BCG治疗膀胱癌的免疫学机制及其联合应用提供参考。方法建立OH-BBN诱导的Fisher344大鼠膀胱癌肿瘤模型,分为空白对照组（生理盐水）、模型组（生理盐水）、猪苓多糖组(25 mg·kg^-1)、BCG组(25 mg·kg^-1)、猪苓多糖高(50 mg·kg^-1)/中(25 mg·kg^-1)/低(12.5 mg·kg^-1)剂量分别联合BCG组;每周膀胱灌注给药1次,连续给药6周后观察膀胱形态变化并测定体积大小,计算膀胱、脾脏、胸腺、肾脏和肝脏指数;采用FACS技术分别检测外周血与脾脏T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8及CD25,NK细胞表面分子CD161,巨噬细胞表面分子CD11b、CD68及CD86的表达。结果模型组大鼠膀胱内壁可见乳头状、菜花状肿瘤突起,局部呈紫红色,个别伴有膀胱结石。与模型组相比,各给药组膀胱内壁肿瘤突起显著减少,猪苓多糖组的膀胱形态与正常组较为接近;与模型组比较,猪苓多糖组、BCG组、猪苓多糖联合BCG各组的膀胱体积大小和膀胱指数均有显著性差异（P<0.05）,猪苓多糖、猪苓多糖高剂量联合BCG组的脾脏指数明显降低（P<0.05）;猪苓多糖和BCG组对外周血T细胞亚群无明显影响,但联合给药各组的CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD4⁺CD25⁺表达显著升高（P<0.05）,且具有一定猪苓多糖剂量相关性(12.5⁵0 mg·kg^-1);BCG组外周血NK细胞的CD3^-CD161⁺表达与模型组比较显著升高（P<0.05）;给药组外周血M1巨噬细胞的CD11b⁺CD68⁺CD86⁺表达与模型组比较均显著性升高（P<0.05）,其中BCG组的差异最为显著（P<0.01）;猪苓多糖组能显著上调脾脏T淋巴细胞亚群CD3⁺CD4⁺的表达（P<0.05）、下调CD3⁺CD8⁺的表达（P<0.05）;猪联合给药各组均能显著上调脾脏T淋巴细胞CD3⁺CD8⁺/CD3⁺CD4⁺的表达（P<0.05）;联合给药各组均能显著上调脾脏NK细胞CD3-CD161⁺的表达（P<0.05）,猪苓多糖组、BCG组无明显影响;猪苓多糖组能明显上调脾脏M1巨噬细胞CD11b⁺CD68⁺CD86⁺的表达（P<0.05）,其余各组对M1巨噬细胞无明显影响,但联合给药各组脾脏巨噬细胞CD11b⁺CD68⁺的表达较模型组明显升高（P<0.01）。结论猪苓多糖、BCG及其两者联用经膀胱灌注给药能调节T淋巴细胞亚群、NK淋巴细胞水平,且联合应用时能显著升高脾脏巨噬细胞水平,从而促进天然免疫与适应性免疫功能的恢复,达到治疗OH-BBN诱导的Fisher344大鼠膀胱癌的目的。更多还原