L-羟脯氨酸喂饲法诱导建立大鼠肾草酸钙结石模型

【作者】 向松涛； 周建甫； 李静； 汪茜；

【机构】 广州中医药大学附属广东省中医院泌尿外科；

【摘要】 目的:建立L-羟脯氨酸诱导的大鼠肾草酸钙结石模型,并与传统乙二醇联合氯化铵造模进行比较。方法:将18只雄性SD大鼠随机分为3组,即空白对照组(A组),给予正常饮用水+普通鼠粮;乙二醇+氯化铵组(B组),给予0.75%乙二醇(28天)+1%氯化铵饮水(5天)+普通鼠粮;羟脯氨酸组(C组),给予正常饮用水+含5%L-羟脯氨酸的特制鼠粮。造模28天后,采集各组大鼠3h晨尿、24尿液、血液及双肾组织,分别检测大鼠尿结晶、尿液p H值、24h尿量、尿钙、尿镁、尿草酸、尿枸橼酸、尿肌酐、血肌酐、血尿素氮;右肾组织作病理切片行H&E染色和钙盐染色,分别光学显微镜及偏光显微镜观察大鼠肾脏病理改变及草酸钙结晶的沉积情况,免疫组化检测OPN、MCP-1、TGF-Β的蛋白表达;左肾组织匀浆后检测分别过氧化物MDA和抗氧化酶SOD、GSH-Px、CAT的含量。结果:B组、C组肾脏重量、尿结晶、肾脏草酸钙结晶沉积、24h尿草酸等均显著高于A组(p<0.05),并且尿钙、尿镁、尿柠檬酸较A组显著降低(p<0.05),提示乙二醇+氯化铵和L-羟脯氨酸两种方法均可造成高草酸尿环境,从而引起大鼠肾草酸钙结晶沉积,并且发现C组各大鼠肾脏成石效果较B组均衡、稳定;B组、C组尿量、血肌酐、血尿素氮显著高于A组(p<0.05),B组、C组的MDA水平高于A组,而SOD、GSH-Px、CAT的含量则不同程度的低于A组,说明两组造模方法都对肾脏功能具有损伤作用,可能通过氧化应激及炎症反应来介导,其中C组的血肌酐、尿素氮、MDA水平高于B组,而p H值低于B组,提示L-羟脯氨酸的氧化应激损伤较B组严重,同时伴有肾小管酸中毒;免疫组化显示MCP-1、OPN和TGF-β等蛋白在B、C组均有表达,并且B组较C组表达更强。结论:L-羟脯氨酸喂饲法建立大鼠肾草酸钙结石模型造模效果稳定、确切,但5%L-羟脯氨酸的肾毒性仍然较传统乙二醇联合氯化铵大,L-羟脯氨酸未必是一种作用温和的造模药物。更多还原