白及疫病病原菌鉴定及化学药剂筛选

【作者】 霍行； 张耀文； 李凤芳； 刘晨雨； 黎起秦； 林纬； 袁高庆；

【机构】 广西大学农学院；

【摘要】 2017年在广西资源和南宁的白及种植地发生一种病害,多从叶尖或叶缘始发,初为水渍状,之后扩展形成不规则形褐色至黑褐色大斑,最后病叶湿腐;病斑也可从茎基部向心叶扩展,造成心腐,病株易拔起;湿度大时病部可见稀疏白色霉层,镜检为疫霉。条件合适时病情扩展速度很快。目前国内外对白及病害的研究较少,本文对该病病原进行鉴定并开展化学药剂的室内筛选,为防治该病提供科学依据。本研究采用选择性培养基从不同发病植株上分离获得4株菌株（phy1、phy2、phy3和phy4）,形态特征主要表现为:孢子囊卵圆形或球形,有乳突,平均大小为40.61μm×34.9μm,可产生游动孢子,休止孢子球形,直径平均为9.8μm;藏卵器球形,直径平均为19.5μm;雄器近球形或圆筒形,围生,平均大小为11.7μm×9.5μm;卵孢子球形,直径平均为17.2μm,满器或不满器;可产生近球形厚垣孢子,平均大小为18.1μm×17.3μm。对4株菌株的ypt1基因、coxI基因和rDNA-ITS基因序列进行测定（GenBank中登录号为MG765402～MG765413）,BLAST比对显示与Phytophthora nicotianae（DQ162981、AY564196、KC248202等）的同源性为99%～100%,多基因系统进化分析表明4株菌株均为P.nicotianae。致病性测定结果显示,4株菌株对白及叶片均表现出较强致病性,重新分离又获得同样菌物。结合形态学特征、多基因分子系统发育分析以及致病性测定结果,确定发生在广西的白及新病害是由烟草疫霉引起的白及疫病。对代表菌株进行了生物学特性测定和化学药剂室内筛选。该病原菌最适培养基为V8培养基,生长温度范围为15～37℃,最适生长温度为28℃;生长pH值范围为2～11,最适生长pH值为7;最适碳源和氮源分别为淀粉和蛋白胨,黑暗条件下菌丝生长较好。用生长速率法初步测定了22种杀菌剂对白及疫病菌的抑制作用,发现病菌对氟噻唑吡乙酮、申嗪霉素、烯酰吗啉·嘧菌酯和嗯霜锰锌等4种药剂比较敏感。测定了这4种杀菌剂对白及疫病病菌的毒力,氟噻唑吡乙酮的EC₅₀最小,为0.0142μg/mL,嗯霜锰锌的EC₅₀最大,是11.156μg/mL,申嗪霉素和烯酰吗啉·嘧菌酯的EC₅₀分别为1.286μg/mL和4.112μg/mL。更多还原