重组甲状旁腺素_1-34促进家兔实验骨折愈合观察

【作者】 于顺禄；

【机构】 天津市天津医院骨研所；

【摘要】 目的:通过实验动物骨折模型观察重组人甲状旁腺素_1-34片段(rhPTH_1-34)促进骨折愈合作用,并初步探讨rhPTH_1-34的作用机制。方法:实验家兔随机分为4组,每组12只,在骨折造模当日即开始用药。rhPTH_1-34由上海赛金生物医药有限公司提供,批号:20120701。①低剂量组:给rhPTH_1-3410μg·kg^-1·d^-1,皮下注射,连续给药至动物处死。②中剂量组:给rhPTH_1-3430μg·kg^-1·d^-1,皮下注射,连续给药至动物处死。③高剂量组:给rhPTH_1-3490μg·kg^-1·d^-1,皮下注射,连续给药至动物处死。④对照组:注射溶媒液1 mL,每天皮下注射,连续给药至动物处死。上述4组均在给药前抽取静脉血保存备检,结果作为术前基础值;术后2周及4周各组均处死一组动物。处死前抽取静脉血,分离血清备查骨特异性碱性磷酸酶（bone specific alkaline phosphotase,bAKP）、骨钙素（BGP）、骨保护素（Osteoprotegerin,OPG）、白介素-6（IL-6）及血Ca、P等生化指标。处死后拍双前臂X线片,然后切取前臂骨折部分标本,进行病理组织形态学及骨组织形态计量学观察。骨计量学取材标本动物于处死前8 d与3 d（间隔5d）,由耳缘静脉注射两次四环素（25mg/kg）进行活体标记^[3]。进行病理组织形态学及骨组织形态计量学观察。结果:X线片和组织学结果显示,与对照组相比,rhPTH_1-34各组骨折愈合速度加快,骨形成活跃。rhPTH各组在术后1周后,血清bAKP均明显升高（P<0.05）。随后高剂量组bAKP仍呈上升趋势,其余各组随骨折愈合而逐渐下降至正常水平。实验各组血清OPG水平在2周达到最高值,随后除高剂量组外,也相对维持在高的水平。IL-6在术后各组均有一定程度的升高,术后30d,空白对照组出现明显升高,而实验用药各组在1、2周间无明显差别,但均比手术前有明显的升高。血钙水平,在术后1周用药组出现降低现象,血磷则在30d出现降低,且与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论:早在2002年,Lilly公司的PTH_1-34产品、特立帕肽（Teriparatide）就经美国FDA批准用于治疗绝经后妇女骨质疏松症和原发性骨质疏松症,2003年初即上市^[5]。近年来发现PTH可加强骨细胞溶解骨钙、破骨细胞吸收骨基质的作用,同时也可促进骨细胞形成及骨的矿化作用。研究发现间歇性地补充外源PTH可以增强新生小鼠骨骼中间充质细胞向成骨细胞的分化、定向增生,同时可抑制成骨细胞谱系的凋亡^[6],间歇注射PTH有助于骨折恢复（形态计量学参数和机械分析参数均有剂量依赖性升高的特性）。rhPTH_1-34可以促进骨折早期愈合,促进骨形成并且可抑制骨吸收。更多还原