基于28S rRNA基因序列的巢式PCR方法快速检测甲真菌病病原菌种的研究

【作者】 杨静； 董碧麟； 胡志敏； 尹婧； 童中胜；

【机构】 武汉市第一人民医院皮肤科； 武汉市第一人民医院检验科；

【摘要】 目的:应用基于28S rRNA基因序列的巢式PCR的方法快速诊断甲真菌病病原菌种。方法:液氮甲标本,微量法提取DNA,应用特异性引物,巢式PCR方法扩增DNA。结果:本组共收集180例直接镜检和培养均为阳性的甲标本,First PCR 144例阳性,Nest PCR 168例阳性。其中127例标本经PCR扩增可产生约137bp目的片段,为红色毛癣菌;26例标本经PCR扩增可产生约102bp目的片段,为须癣毛癣菌;10例标本经PCR扩增可产生约445bp目的片段,为白念珠菌;5例标本经PCR扩增可产生约170bp目的片段,为曲霉。巢式PCR敏感性为93.33%(168/180),特异性为100%(168/168)。结论:此方法是一种快速、敏感、特异的诊断甲真菌病病原菌种的方法。更多还原