表皮松解性掌跖角化症(EPPK)突变小鼠模型的构建和shRNA治疗研究

【作者】 吕雅素； 史培良； 陈晓玲； 汤悦笑； 王艳芳； 栾晓睿； 赵静； 林兆宇； 高翔； 张咸宁；

【机构】 浙江大学医学部； 南京大学模式动物研究所； 浙江中医药大学；

【摘要】 目的 KRT9是表皮松解性掌跖角化症(epidermolytic palmoplantar keratoderma,EPPK)的主要致病基因。方法通过构建与EPPK患者KRT9突变c.500del Ains GGCT同源性的小鼠Krt9基因c.434del Ains GGCT突变载体,用基因打靶技术筛选获得突变敲入小鼠。设计si RNA引物,皮下注射至足垫处,尝试基因治疗。结果表型分析、组织学检测、蛋白印迹实验和免疫组化分析等发现,突变敲入小鼠在遗传方式和表型上都高度模拟人EPPK的发生、发展;sh RNA治疗可使突变小鼠的患病部位几乎恢复正常。结论突变的K9蛋白可能阻碍了正常K9/K1二聚体的形成,从而导致作为小鼠机械承受力最大的足垫区表皮细胞骨架的崩塌,K2角蛋白的减少和抗压能力较弱的其他角蛋白——K10、K6和K16代偿性地表达增高,可能使得上基底层细胞发生细胞溶解,而基底细胞的过度增殖使得棘层、颗粒层细胞数量增多和不规整排列,可能最终导致了突变小鼠出现EPPK相似的角化过度和皮肤松解症状。基因治疗有望带来EPPK临床治疗的曙光。更多还原