胞内脂滴定量分析的方法比较

【作者】 秦先红； 潘红梅； 陈磊； 王金勇； 朱砺；

【机构】 四川农业大学动物科技学院； 重庆市畜牧科学院； 资阳市雁江区农业局；

【摘要】 脂滴作为细胞内一种动态的细胞器,在细胞内有着十分重要的作用,因此,细胞内脂滴的定量十分重要。本研究以猪卵母细胞为模型,通过荧光染料特异性标记脂滴,利用两种非破坏性的形态学方法——三维重建分析法和平面光密度法对单个细胞内脂滴含量进行准确定量和对比分析。结果表明,两种方法都能根据荧光网像定量细胞内脂滴,并统计出脂滴大小、密度、分布规律等指标;随机选取100个脂滴含量不等的卵母细胞,三维重建分析法能更准确地反映样本脂滴含量变异情况(变异系数C.V.=0.86),而光密度法C.V.=0.68;针对同一细胞不同角度的重复观察,三维重建分析法具有更好的重复性(变异系数C.V.=0.07,组内相关系数ICC>0.9),而光密度法C.V.=0.37、ICC<0.4。结论:基于激光共聚焦扫描的三维重建法,能够更准确地对细胞内的脂滴含量进行定量分析。更多还原