猪源大肠杆菌脂多糖提取纯化及活性分析

【作者】 冯将； 李鹏飞； 鲜思美；

【机构】 贵州大学动物科学学院； 贵州大学生化工程中心；

【摘要】 (目的)为了提取、纯化猪源大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)并检测其活性。(方法)在本研究中,通过热酚水法从大肠杆菌中提取高纯度、低蛋白和低核酸污染的LPS。纯化的LPS通过SDS-PAGE银染、考马斯亮蓝、鲎试剂、BSA法和苯酚硫酸法分析评价其活性。(结果)表明银染梯状条带符合LPS的特征,通过考马斯亮蓝染色和BSA显示LPS的蛋白含量为0.614%,琼脂糖凝胶电泳与酶标仪检测显示核酸含量为0.128%,苯酚硫酸法测定显示LPS的糖含量为13.8717%,LAL试验证明纯化的LPS的活性为8.47×10~5EU/mL。(结论)结果表明,该方法能够制备高纯度、高活性、低蛋白和核酸污染的LPS。更多还原