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2型猪链球菌Sao蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
【机构】 南京军区军事医学研究所； 温州医科大学检验医学院生命科学学院； 无锡市妇幼保健院检验科；
【摘要】 目的制备2型猪链球菌Sao蛋白的单克隆抗体并鉴定。方法以纯化的重组Sao蛋白为免疫原,皮下多点注射免疫Balb/c小鼠,加强免疫后3天取其脾脏与SP2/0进行常规融合,间接ELISA法筛选分泌抗Sao特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞。用杂交瘤细胞诱导小鼠产生腹水,HiTrap proteinG亲和层析柱纯化腹水。采用Ig亚类鉴定试剂盒鉴定单克隆抗体的亚型。测定腹水效价,并观察Sao单克隆抗体与菌体表面Sao蛋白的结合情况。结果获得4株能够稳定分泌抗Sao单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1G5、1B10、2A10、3A6,经鉴定4株单克隆抗体重链均为IgG1亚型。4株腹水型单克隆抗体的效价均在1:1024800,且能够与05ZYH33表面天然构象的Sao蛋白结合,从而对细菌形态产生影响。结论制备的Sao蛋白单克隆抗体效价高且能够与天然构象的Sao蛋白结合,为2型猪链球菌的快速临床诊断以及Sao蛋白的功能研究奠定了基础。
- 【会议录名称】 纪念中国微生物学会临床微生物学专业委员会成立五周年-第五届中国临床微生物学大会暨台湾海峡两岸微生物学与免疫学论坛论文汇编
- 【会议名称】纪念中国微生物学会临床微生物学专业委员会成立五周年-第五届中国临床微生物学大会暨台湾海峡两岸微生物学与免疫学论坛
- 【会议时间】2014-09-13
- 【会议地点】中国浙江宁波
- 【分类号】R392
- 【主办单位】中国微生物学会临床微生物学专业委员会、医学参考报社、宁波大学医学院附属医院