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E731K FGFR2突变基因真核表达载体的构建
【机构】 山东省罕少见病重点实验室山东省医药生物技术研究中心卫生部生物技术药物重点实验室山东省医学科学院；
【摘要】 目的:构建E731KFGFR2-3×FlagCMV真核表达载体,为研究E731K FGFR2突变基因的功能奠定基础。方法:采用定点突变试剂盒对正常人源FGFR2基因进行定点突变,携带有XhoⅠ和XbaⅠ酶切位点的PCR引物扩增目的基因,分别对胶回收PCR产物和3×FlagCMV表达载体进行双酶切,并切胶回收,T4DNA连接酶16℃连接过夜,转化感受态大肠杆菌DH5α,挑选克隆并进行菌落PCR,挑选其中阳性克隆送公司测序。结果:测序结果表明,成功构建了E731KFGFR2-3×FlagCMV真核表达载体。
【关键词】 E731K；
FGFR2；
3×FlagCMV表达载体；
- 【会议录名称】 第八届全国医学生物化学与分子生物学第五届全国临床应用生物化学与分子生物学2013华东六省一市生物化学与分子生物学联合学术研讨会论文汇编
- 【会议名称】第八届全国医学生物化学与分子生物学第五届全国临床应用生物化学与分子生物学2013华东六省一市生物化学与分子生物学联合学术研讨会
- 【会议时间】2013-08-19
- 【会议地点】中国山东青岛
- 【分类号】R346
- 【主办单位】中国生物化学与分子生物学会医学生物化学与分子生物学分会、中国生物化学与分子生物学会临床应用生物化学与分子生物学分会、华东六省一市生物化学与分子生物学学会、江苏省生物化学与分子生物学学会、上海市生物化学与分子生物学学会、浙江省生物化学与分子生物学学会、安徽省生物化学与分子生物学学会、福建省生物化学与分子生物学学会、江西省生物化学与分子生物学学会、山东省生物化学与分子生物学学会